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DNA的粗提取与鉴定实验的改进
人阅读 发布时间：2014-08-09 10:35
1、实验原理
鸟类血液中红细胞有细胞核，细胞核内DNA与蛋白质结合成染色质。利用DNA在0.12－0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，可使溶液中的DNA形成沉淀析出，通过过滤，得到初提取的DNA。再利用DNA不溶于酒精溶液，而细胞中其他物质可溶于酒精的特点，进一步提取含杂质较少的DNA。
DNA遇二苯胺，加少许乙醛，沸水浴中显蓝色，利用这一原理可对DNA进行鉴定。
2、方法步骤及改进,实验的关键步骤
本实验成功的关键，是保证提取到足量且较纯净的DNA。因为DNA在细胞中含量少，所以在下列步骤中应特别注意：在步骤1中使用的鸡血的量要在150ml左右。提取细胞核物质时要充分搅拌5min以上。在步骤4中加蒸馏水要控制好量，同时用竹筷缓缓搅动使DNA聚集其上。在步骤5要充分搅拌，在步骤7中应使用冷却的酒精（至少在5℃以下存放24h）。因为DNA易吸附在玻璃容器上，所以实验中最好使用塑料烧杯和试管，以减少DNA的损失。同时为了能在DNA鉴定步骤中较快、较好地出现蓝色，可将相应的NaCl溶液量和二苯胺试剂量都减少一半左右。
鸟类血液中红细胞有细胞核，细胞核内DNA与蛋白质结合成染色质。利用DNA在0.12－0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，可使溶液中的DNA形成沉淀析出，通过过滤，得到初提取的DNA。再利用DNA不溶于酒精溶液，而细胞中其他物质可溶于酒精的特点，进一步提取含杂质较少的DNA。
DNA遇二苯胺，加少许乙醛，沸水浴中显蓝色，利用这一原理可对DNA进行鉴定。
2、方法步骤及改进,实验的关键步骤
本实验成功的关键，是保证提取到足量且较纯净的DNA。因为DNA在细胞中含量少，所以在下列步骤中应特别注意：在步骤1中使用的鸡血的量要在150ml左右。提取细胞核物质时要充分搅拌5min以上。在步骤4中加蒸馏水要控制好量，同时用竹筷缓缓搅动使DNA聚集其上。在步骤5要充分搅拌，在步骤7中应使用冷却的酒精（至少在5℃以下存放24h）。因为DNA易吸附在玻璃容器上，所以实验中最好使用塑料烧杯和试管，以减少DNA的损失。同时为了能在DNA鉴定步骤中较快、较好地出现蓝色，可将相应的NaCl溶液量和二苯胺试剂量都减少一半左右。
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