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利什曼ELISA试剂盒Leishmania IgG
人阅读 发布时间：2014-04-04 10:04
利什曼ELISA试剂盒Leishmania IgG
1、应用范围
此试剂盒可用于人血清中抗内脏利什曼原虫IgG的筛查检测。
2、前言说明
内脏利什曼病（VL）是一种死亡率很高的恶性疾病，主要由杜氏利什曼原虫引起。白蛉是VL传播的主要媒介，而狗是白蛉的主要携带者。VL是许多国家的一种地方性疾病，在大多发展中国家中，VL也是一个严重的问题，特别在那些人口集中的城市里。这种疾病在拉丁美洲、东非、中东、印度和中国都有很高的发病率。VL也会传播到靠近地中海的一些国家去，如意大利、法国南部、西班牙、葡萄牙和非洲南部。在欧洲南部，VL已成为AIDS病人中主要的机会性传染病。急性VL的诊断通常是通过抽吸骨髓来直接鉴别其寄生虫。这种鉴定方法对人体有侵袭性，疼痛并且危险，而且经常因不能从组织中分离到寄生虫而使得鉴定的成功率非常小。另外，在急性疾病阶段，抗利什曼原虫抗体的滴度非常高，血清筛查的方法已广泛被应用。ELISA应当是VL血清学诊断的首选实验方法，尽管免疫荧光抗体检测和直接凝集实验检测的是整个寄生虫，但它们仍然被广泛应用（ELISA一起用或单独用）。
3、实验原理
在第一次温育时，病人血清中的抗体结合到检测孔的抗原上。在第二次温育时，酶复合物可结合到抗原抗体复合物上。洗板除去未结合的酶联物，加入显色剂，有酶联物和过氧化物酶的情况下会显示蓝色。之后加入终止液终止酶反应，此时溶液由蓝色变成黄色。
4、试剂盒成分
1）包被了利什曼原虫抗原的微孔板
2）酶联物
3）阳性质控
4）阳性质控
5）显色剂
6）浓缩洗涤液
7）稀释缓冲液
8）终止掖
5、储存条件
试剂、板条和瓶装成分
l 储存于2-8℃的环境下。
l 含洗涤液的洗涤瓶必须储存在室温下。
6、准备
洗涤缓冲液：打开试剂瓶，在其中加入475ml去离子水，之后将稀释好的洗涤缓冲液到入塑料挤瓶。
实验样品：用稀释缓冲液制备1：40的病人血清。
7、血清的采集与准备： 略
8、实验步骤： 略
9、结果说明
分光光度计：450nm和620-650nm处读取OD值。
阳性：OD值大于或等于0.2。
阴性：OD值小于0.2。
视觉：如果反应液所显示的颜色很明显，则样品应当被视为阳性。
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